Antifungal activity of 2-chloro-N-phenylacetamide: a new molecule with fungicidal and antibiofilm activity against fluconazole-resistant Candida spp / Atividade antifúngica de 2-cloro-N-fenilacetamida: uma nova molécula com atividade fungicida e anti-biofilme contra Candida spp. resistentes a fluconazol

In the current context of emerging drug-resistant fungal pathogens such as Candida albicans and Candida parapsilosis, discovery of new antifungal agents is an urgent matter. This research aimed to evaluate the antifungal potential of 2-chloro-N-phenylacetamide against fluconazole-resistant clinical strains of C. albicans and C. parapsilosis. The antifungal activity of 2-chloro-N-phenylacetamide was evaluated in vitro by the determination of the minimum inhibitory concentration (MIC), minimum fungicidal concentration (MFC), inhibition of biofilm formation and its rupture, sorbitol and ergosterol assays, and association between this molecule and common antifungal drugs, amphotericin B and fluconazole. The test product inhibited all strains of C. albicans and C. parapsilosis, with a MIC ranging from 128 to 256 µg.mL-1, and a MFC of 512-1,024 µg.mL-1. It also inhibited up to 92% of biofilm formation and rupture of up to 87% of preformed biofilm. 2-chloro-N-phenylacetamide did not promote antifungal activity through binding to cellular membrane ergosterol nor it damages the fungal cell wall. Antagonism was observed when combining this substance with amphotericin B and fluconazole. The substance exhibited significant antifungal activity by inhibiting both planktonic cells and biofilm of fluconazole-resistant strains. Its combination with other antifungals should be avoided and its mechanism of action remains to be established.

No atual contexto de patógenos fúngicos resistentes emergentes tais como Candida albicans e Candida parapsilosis, a descoberta de novos agentes antifúngicos é uma questão urgente. Esta pesquisa teve como objetivo avaliar o potencial antifúngico da 2-cloro-N-fenilacetamida contra cepas clínicas de C. albicans e C. parapsilosis resistentes a fluconazol. A atividade antifúngica da substância foi avaliada in vitro através da determinação da concentração inibitória mínima (CIM), concentração fungicida mínima (CFM), ruptura e inibição da formação de biofilme, ensaios de sorbitol e ergosterol, e associação entre esta molécula e antifúngicos comuns, anfotericina B e fluconazol. O produto teste inibiu todas as cepas de C. albicans e C. parapsilosis, com uma CIM variando de 128 a 256 µg.mL-1, e uma CFM de 512-1,024 µg.mL-1. Também inibiu até 92% da formação de biofilme e causou a ruptura de até 87% de biofilme pré-formado. A 2-cloro-N-fenilacetamida não promoveu atividade antifúngica pela ligação ao ergosterol da membrana celular fúngica, tampouco danificou a parede celular. Antagonismo foi observado ao combinar esta substância com anfotericina B e fluconazol. A substância exibiu atividade antifúngica significativa ao inibir tanto as células planctônicas quanto o biofilme das cepas resistentes ao fluconazol. Sua combinação com outros antifúngicos deve ser evitada e seu mecanismo de ação deve ser estabelecido.

Antifungal activity of 2-chloro-N-phenylacetamide: a new molecule with fungicidal and antibiofilm activity against fluconazole-resistant Candida spp

Abstract In the current context of emerging drug-resistant fungal pathogens such as Candida albicans and Candida parapsilosis, discovery of new antifungal agents is an urgent matter. This research aimed to evaluate the antifungal potential of 2-chloro-N-phenylacetamide against fluconazole-resistant clinical strains of C. albicans and C. parapsilosis. The antifungal activity of 2-chloro-N-phenylacetamide was evaluated in vitro by the determination of the minimum inhibitory concentration (MIC), minimum fungicidal concentration (MFC), inhibition of biofilm formation and its rupture, sorbitol and ergosterol assays, and association between this molecule and common antifungal drugs, amphotericin B and fluconazole. The test product inhibited all strains of C. albicans and C. parapsilosis, with a MIC ranging from 128 to 256 µg.mL-1, and a MFC of 512-1,024 µg.mL-1. It also inhibited up to 92% of biofilm formation and rupture of up to 87% of preformed biofilm. 2-chloro-N-phenylacetamide did not promote antifungal activity through binding to cellular membrane ergosterol nor it damages the fungal cell wall. Antagonism was observed when combining this substance with amphotericin B and fluconazole. The substance exhibited significant antifungal activity by inhibiting both planktonic cells and biofilm of fluconazole-resistant strains. Its combination with other antifungals should be avoided and its mechanism of action remains to be established.

Resumo No atual contexto de patógenos fúngicos resistentes emergentes tais como Candida albicans e Candida parapsilosis, a descoberta de novos agentes antifúngicos é uma questão urgente. Esta pesquisa teve como objetivo avaliar o potencial antifúngico da 2-cloro-N-fenilacetamida contra cepas clínicas de C. albicans e C. parapsilosis resistentes a fluconazol. A atividade antifúngica da substância foi avaliada in vitro através da determinação da concentração inibitória mínima (CIM), concentração fungicida mínima (CFM), ruptura e inibição da formação de biofilme, ensaios de sorbitol e ergosterol, e associação entre esta molécula e antifúngicos comuns, anfotericina B e fluconazol. O produto teste inibiu todas as cepas de C. albicans e C. parapsilosis, com uma CIM variando de 128 a 256 µg.mL-1, e uma CFM de 512-1,024 µg.mL-1. Também inibiu até 92% da formação de biofilme e causou a ruptura de até 87% de biofilme pré-formado. A 2-cloro-N-fenilacetamida não promoveu atividade antifúngica pela ligação ao ergosterol da membrana celular fúngica, tampouco danificou a parede celular. Antagonismo foi observado ao combinar esta substância com anfotericina B e fluconazol. A substância exibiu atividade antifúngica significativa ao inibir tanto as células planctônicas quanto o biofilme das cepas resistentes ao fluconazol. Sua combinação com outros antifúngicos deve ser evitada e seu mecanismo de ação deve ser estabelecido.

Antifungal analysis of incorporation of the essential oil of Cymbopogon citratus (D.C.) Stapf into polymethyl methacrylate / Análise antifúngica da incorporação do óleo essencial de Cymbopogon citratus (d.c.) Stapf em polimetacrilato de metila

ABSTRACT Objective: Evaluated the antifungal effect of the incorporation of different concentrations of the essential oil Cymbopogon citratus (capim santo), into polymethylmethacrylate (PMMA) against Candida albicans. Methods: Fifty specimens were fabricated and divided into five groups: Group 1, PMMA + 10% essential oil (n=10); Group 2, PMMA + 15% essential oil (n=10); Group 3, PMMA + 20% essential oil (n=10); Group 4, PMMA + 25% essential oil (n=10); Group 5, PMMA (n=10). PMMA powder was mixed with the monomer and the mixture was placed in disc-shaped cavities measuring 15 mm in diameter, 2 mm thick. To evaluate the antifungal activity of the experimental specimens, the standard strain of Candida albicans was tested. After incubation, the colony count of each plate was performed using a digital colony counter, obtaining the number of colony forming units (CFU) and the Kruskal-Wallis test was applied. Results: There was statistically significant difference in the CFU count of Candida albicans as a consequence of the addition of Cymbopogon citratus essential oil to PMMA (p < 0.001) and values were significantly higher in comparison with those of all the other groups, when the essential oil was incorporated as incorporated into the PMMA in the concentration of 20%. In the other concentrations, no difference in values was observed in comparison with the Control Group without essential oil of Cymbopogon citratus. Conclusion: The acrylic resin with the essential oil incorporated into it in different concentrations provided no effect against development of the genus Candida.

RESUMO Objetivo: Avaliar o efeito antifúngico da incorporação de diferentes concentrações do óleo essencial Cymbopogon citratus (capim santo), em polimetilmetacrilato (PMMA) contra Candida albicans. Métodos: Cinquenta corpos de prova foram confeccionados e divididos em cinco grupos: Grupo 1, PMMA + 10% de óleo essencial (n=10); Grupo 2, PMMA + 15% de óleo essencial (n=10); Grupo 3, PMMA + 20% de óleo essencial (n=10); Grupo 4, PMMA + 25% de óleo essencial (n=10); Grupo 5, PMMA (n=10). O pó de PMMA foi misturado ao monômero e a mistura foi colocada em cavidades em forma de disco medindo 15 mm de diâmetro por 2 mm de espessura. Para avaliar a atividade antifúngica dos espécimes experimentais, foi testada a cepa padrão de Candida albicans. Após a incubação, foi realizada a contagem de colônias de cada placa por meio de um contador digital de colônias, obtendo-se o número de unidades formadoras de colônias (UFC) e para isso foi aplicado o teste de Kruskal-Wallis. Resultados: Houve diferença estatisticamente significativa na contagem de UFC de Candida albicans como consequência da adição do óleo essencial de Cymbopogon citratus ao PMMA (p < 0,001) e os valores foram significativamente maiores em comparação com todos os outros grupos, quando o essencial óleo foi incorporado como incorporado ao PMMA na concentração de 20%. Nas demais concentrações, não houve diferença nos valores em relação ao Grupo Controle sem óleo essencial de Cymbopogon citratus. Conclusão: A resina acrílica com o óleo essencial incorporado a ela em diferentes concentrações não apresentou efeito contra o desenvolvimento do gênero Candida.

Aspectos da abordagem terapêutica sobre candidíase vulvovaginal / Aspects of the therapeutic approach to vulvovaginal candidiasis / Aspectos del abordaje terapéutico de la candidiasis vulvovaginal

A candidíase vulvovaginal, é uma infecção da vulva e vagina causada por vários tipos de Candida spp. Essa patologia afeta 75% de todas as mulheres pelo menos uma vez durante a vida, ocorrendo com mais frequência durante a idade fértil. A transmissão dessa infeção fúngica ocorre por meio de contato com mucosas e secreções em pele de portadores ou doentes, contato sexual, água contaminada e transmissão vertical. Alguns outros sintomas característicos mais vistos em casos de CVV, são lesões brancas, cremosas e planas, sendo mais intensos no período pré-menstrual, quando a acidez vaginal aumenta. numerosos antifúngicos estão disponíveis no mercado, os quais são encontrados para administração oral na forma de comprimidos ou, para uso tópico, na forma de cremes, loções, comprimidos vaginais, supositórios e tampões revestidos. O objetivo geral do trabalho foi analisar através da revisão de literatura, tratamentos convencionais e alternativos para abordagem terapêutica da Candidíase Vulvovaginal contextuando a mesma, utilizando definições, dados epidemiológicos e sua sintomatologia frente à sociedade. O presente trabalho é uma revisão integrativa, que teve a coleta de dados realizada de março de 2021 a outubro de 2021 nas bases de dados Lilacs, Scielo, Google acadêmico, A busca resultou em 902 artigos, dos quais 14 atenderam ao critério de inclusão. A busca por tratamentos frente a candidíase vulvovaginal tem se mostrado ampla de acordo com os artigos selecionadas. Concluímos que a patologia candidíase vulvovaginal, vem apresentando resistência em algumas abordagens terapêuticas, assim como algumas mulheres não aderem há algum tipo de tratamento, devido à falta de conhecimento sobre a patologia.

Vulvovaginal candidiasis is an infection of the vulva and vagina caused by various types of Candida spp. This condition affects 75% of all women at least once in their lifetime, occurring more frequently during their childbearing years. The transmission of this fungal infection occurs through contact with mucous membranes and secretions on the skin of patients or patients, sexual contact, contaminated water and vertical transmission. Some other characteristic symptoms more seen in cases of VVC are white, creamy and flat lesions, being more intense in the premenstrual period, when the vaginal acidity increases. numerous antifungals are available on the market which are available for oral administration in tablet form or, for topical use, in the form of creams, lotions, vaginal tablets, suppositories and coated tampons. The general objective of the work was to analyze, through a literature review, conventional and alternative treatments for the therapeutic approach of Vulvovaginal Candidiasis in its context, using definitions, epidemiological data and its symptoms in society. The present work is an integrative review, which had data collection carried out from March 2021 to October 2021 in the Lilacs, Scielo, Google academic databases. The search resulted in 902 articles, of which 14 met the inclusion criteria. The search for treatments against vulvovaginal candidiasis has been shown to be wide according to the selected articles. We conclude that the vulvovaginal candidiasis pathology has been showing resistance in some therapeutic approaches, as well as some women do not adhere to any type of treatment, due to lack of knowledge about the pathology.

La candidiasis vulvovaginal es una infección de la vulva y la vagina cau- sada por diversos tipos de Candida spp. Esta afección afecta al 75% de las mujeres al menos una vez en la vida, siendo más frecuente durante la edad fértil. La transmisión de esta infección fúngica se produce por contacto con mucosas y secreciones de la piel de pacientes o enfermos, contacto sexual, agua contaminada y transmisión vertical. Otros síntomas característicos más observados en los casos de CVV son las lesiones blancas, cremosas y planas, siendo más intensas en el período premenstrual, cuando aumenta la acidez vaginal. Existen en el mercado numerosos antifúngicos disponibles para adminis- tración oral en forma de comprimidos o, para uso tópico, en forma de cremas, lociones, comprimidos vaginales, supositorios y tampones recubiertos. El objetivo general del tra- bajo fue analizar, a través de una revisión bibliográfica, los tratamientos convencionales y alternativos para el abordaje terapéutico de la Candidiasis Vulvovaginal en su contexto, utilizando definiciones, datos epidemiológicos y su sintomatología en la sociedad. El pre- sente trabajo es una revisión integradora, que tuvo recolección de datos realizada de marzo de 2021 a octubre de 2021 en las bases de datos académicas Lilacs, Scielo, Google. La búsqueda resultó en 902 artículos, de los cuales 14 cumplieron los criterios de inclu- sión. La búsqueda de tratamientos contra la candidiasis vulvovaginal se ha mostrado am- plia según los artículos seleccionados. Concluimos que la patología de la candidiasis vul- vovaginal viene mostrando resistencia en algunos abordajes terapéuticos, así como algu- nas mujeres no se adhieren a ningún tipo de tratamiento, debido al desconocimiento de la patología.

Demystifying interactions between micro organisms in oral candidiasis biofilm: the key to enhancing treatments

Introduction: candida albicans is a fungal pathogen that can provoke diseases ranging from oral infections to life-threatening systemic disorders. It is now recognized that oral bacteria, such as the genus Streptococcus, establish synergistic relationships with C. albicans, which could potentially increase the fungi's virulence and pathogenicity. Objective: this narrative review aimed to discuss the Candida-Streptococcus mechanisms of interactions and their contribution to increasing oral candidiasis severity. In addition, it provides a background of biofilm formation and potential therapeutical targets. Sources of Data: searches for papers in English were performed in the Pubmed database until May 2022. MeSH and free terms related to the field were used. In vitro studies were selected, tabulated, and qualitative and quantitative data were analyzed descriptively. Synthesis of Data: among the early colonizers bacteria, evidence pointed out that S. gordonnii and S. oralis have major implications in oral candidiasis, in which mixed biofilms increase the infection severity and challenge the host's defense. On the other hand, the outcomes of the interaction between C. albicans and S. mitis, S. sanguinis, or S. mutans remain little explored in the oral candidiasis scenario, albeit evidence pointed out an enhanced fungus population and virulence factors. Conclusion: overall, considering the polymicrobial profile of the infection and the potential to increase Candida-related disease severity, therapeutical strategies should also consider bacteria management.

Introdução: candida albicans é um patógeno fúngico que pode provocar doenças que variam de infecções orais a distúrbios sistêmicos com risco de vida. Hoje se reconhece que as bactérias orais, como o gênero Streptococcus, estabelecem relações sinérgicas com C. albicans, o que pode potencialmente aumentar a virulência e patogenicidade do fungo. Objetivo: esta revisão narrativa teve como objetivo discutir os mecanismos de interação Candida-Streptococcus e sua contribuição para o agravamento da candidíase oral. Além disso, fornece uma breve explanação sobre a formação do biofilme e potenciais alvos terapêuticos. Fonte dos dados: foi realizada pesquisa na base de dados Pubmed para a busca de artigos publicados em Inglês até maio de 2022. Para isso, foram utilizados descritores relacionados ao tema. Estudos in vitro foram selecionados, tabulados e seus resultados quantitativos e qualitativos analisados descritivamente. Síntese dos dados: entre as bactérias denominadas colonizadores iniciais, evidências apontam que S. gordonnii e S. oralis têm implicações importantes na candidíase oral, na qual biofilmes mistos aumentam a gravidade da infecção e desafiam a defesa do hospedeiro. Por outro lado, os desfechos das interações entre C. albicans e S. mitis, S. sanguinis ou S. mutans permanecem pouco explorados no cenário da candidíase oral, apesar de evidências apontarem um aumento dapopulação fúngica e de fatores de virulência. Conclusão: de maneira geral, considerando o perfil polimicrobiano da infecção e o potencial agravamento das doenças provocadas por Candida spp, as estratégias terapêuticas não devem estar focadas apenas no fungo, mas também devem considerar o manejo da bactéria.

Fatores associados a candidíase vaginal em gestantes: O que exibem as publicações / Factores asociados a la candidiasis vaginal en mujeres embarazadas: Lo que muestran las publicaciones / Factors associated with vaginal canediasis in pregnant women: What the publications exhibit

Objetivo: analisar os fatores associados a candidíase vaginal em gestantes. Método: Trata-se de uma revisão integrativa de literatura realizado na PubMed. Utilizou-se os descritores: "pregnant women", pregnancy, candidiasis, "candidiasis, vulvovaginal". Foram selecionados ao final 07 estudos e o período de busca aconteceu entre os meses de novembro a dezembro de 2021. Resultados: a candidíase vulvovaginal teve uma média da prevalência geral de candidíase foi de 51,71% dos casos mencionados nos estudos. Dentre as manifestações clínicas da candidíase, destaca-se o corrimento alterado, prurido intenso, disúria, irritação ou queimação e dor pélvica Conclusão: A Candida albicans foi a cepa de levedura mais frequentemente identificada, mas, outras espécies também foram descritas, como a C. krusei, C.glabrata, Candida parapsilosis e C. tropicalis. A candidiasé não é letal, mas os sintomas podem definir o diagnóstico clínico da candidíase, na gestação o diagnóstico precoce norteia o tratamento eficiente e contribui para a melhora do prognóstico da gestante.(AU)

Objective: to analyze the factors associated with vaginal candidiasis in pregnant women. Method: This is an integrative literature review carried out at PubMed. The descriptors were used: "pregnant women", pregnancy, candidiasis, "candidiasis, vulvovaginal". At the end, 07 studies were selected and the search period took place between the months of November and December 2021. Results: vulvovaginal candidiasis had an average general prevalence of candidiasis of 51.71% of the cases mentioned in the studies. Among the clinical manifestations of candidiasis, there is an altered discharge, intense itching, dysuria, irritation or burning and pelvic pain. Conclusion: Candida albicans was the most frequently identified yeast strain, but other species were also described, such as C krusei, C. glabrata, Candida parapsilosis and C. tropicalis. Candidiasis is not lethal, but the symptoms can define the clinical diagnosis of candidiasis, in pregnancy, early diagnosis guides efficient treatment and contributes to improving the prognosis of the pregnant woman.(AU)

Objetivo: analizar los factores asociados a la candidiasis vaginal en gestantes. Métodos: Esta es una revisión integradora de la literatura realizada en PubMed. Fueron utilizados los descriptores: "embarazadas", embarazo, candidiasis, "candidiasis, vulvovaginal", al final fueron seleccionados 07 estudios. Resultados: la candidiasis vulvovaginal tuvo una prevalencia general promedio de candidiasis del 51,71% de los casos mencionados en los estudios. Entre las manifestaciones clínicas de la candidiasis se encuentran secreción alterada, prurito intenso, disuria, irritación o ardor y dolor pélvico. Conclusión: Candida albicans fue la cepa de levadura más frecuentemente identificada, pero también se han descrito otras especies, como C. krusei, C. glabrata, Candida parapsilosis y C. tropicalis. Se infiere que la VVC no es letal, pero los síntomas pueden definir el diagnóstico clínico de candidiasis, en el embarazo, el diagnóstico precoz orienta un tratamiento eficaz y contribuye a mejorar el pronósticode la gestante.(AU)

Análise físico-química e atividades antifúngica e antioxidante do óleo essencial da flor de Curatella americana L / Physichochemical analysis, and antifungal and antioxidant activities of the essential oil of Curatella americana L. flower

Introdução: a espécie vegetal Curatella americana produz anualmente inflorescências com aroma adocicado rica em óleo essencial. Objetivo: avaliar as características físico-químicas, e atividades antifúngica e antioxidante do óleo essencial da flor de Curatella americana. Metodologia: as flores foram coletadas em quatro áreas de Cerrado no estado de Goiás; o rendimento de óleo essencial foi obtido através de hidrodestilação; as características físicas foram determinadas para densidade e solubilidade, a atividade antioxidante foi determinada pela redução do radical livre DPPH; a atividade antifúngica foi determinada por inibição das cepas de Candida, Sclerotinia sclerotiorum, Colletotrichum gloeosporioides e Aspergillus flavus. Resultados: o rendimento de óleo foi de 0,18%, densidade de 0,907 g mL-1, solubilidade positiva para EtOH 70%, atividade antioxidante de CI50 µL mL-1 1,95. Atividade de inibição fúngica apenas para Candida tropicalis na concentração de 8% com halo de antibiose de 10 mm. Sensibilidade discreta nas maiores concentrações de 25, 50 e 100 µL-1 para Aspergillus flavus e Sclerotinia sclerotiorum e baixa atividade de inibição para Colletotrichum gloeosporioides. Conclusão: o óleo essencial da flor de Curatella americana apresentou baixo rendimento, entretanto, alta eficiência na redução do radical livre DPPH. As atividades antifúngicas apresentaram bons resultados de inibição, entretanto, torna-se necessário a adição de outros óleos essenciais para aumento das taxas de inibição micelial.

Introduction: the plant species Curatella americana produces annual inflorescences with a sweet flavour rich in essential oil. Objective: to evaluate the physicochemical characteristics, antifungal and antioxidant activities of the essential oil of the Curatella americana flower. Methodology: the flowers were collected in four areas of Cerrado in the state of Goiás; the essential oil yield was obtained through hydrodistillation; the physical characteristics were determined for density and solubility, the antioxidant activity was determined by the reduction of the free radical DPPH; antifungal activity was determined by inhibiting the strains of Candida, Sclerotinia sclerotiorum, Colletotrichum gloeosporioides and Aspergillus flavus. Results: the oil yield was 0.18%, density 0.907 g mL-1, positive solubility for EtOH 70%, antioxidant activity of IC50 µL mL-1 1.95. Fungal inhibition activity only for Candida tropicalis at a concentration of 8% with a 10 mm antibiosis halo. Discrete sensitivity in the highest concentrations of 25, 50 and 100 µL-1 for Aspergillus flavus and Sclerotinia sclerotiorum and low inhibition activity for Colletotrichum gloeosporioides. Conclusion: The essential oil of the Curatella americana flower showed low yield, however, high efficiency in reducing DPPH free radical. Antifungal activities showed good inhibition results, however, it is necessary to add other essential oils to increase mycelial inhibition rates.

Desenvolvimento de formulações probióticas de isolados clínicos de Lactobacillus spp. para controle de Candida albicans / Development of probiotic formulations of clinical isolates of Lactobacillus spp. for the control of Candida albicans

O uso de probióticos tem sido considerado uma alternativa para o controle das candidoses bucais, como a estomatite protética. Recentemente, nosso grupo de pesquisa isolou cepas clínicas bucais de Lactobacillus rhamnosus (5.2) e Lactobacillus fermentum (20.4) com atividade antifúngica contra Candida albicans. Entretanto, é necessário o desenvolvimento de formulações para uso clínico dessas cepas probióticas na cavidade bucal. Assim, o objetivo desse projeto foi desenvolver formulações probióticas em hidrogel gellan gum com atividade antifúngica que possam ser usadas no controle da estomatite protética. Para o preparo das formulações probióticas, as cepas L. rhamnosus 5.2 ou L. fermentum 20.4 foram incorporadas em formulações com diferentes concentrações de gellan gum (0,6 a 1%). A viabilidade das células de Lactobacillus nas formulações e o sistema de liberação foram testados em diferentes condições de armazenamento, incluindo tempo e temperaturas de estocagem. A seguir, os efeitos das formulações probióticas foram avaliados sobre C. albicans pelo método de difusão em ágar e sobre biofilmes microcosmos por contagem de células viáveis e análise de microscopia eletrônica de varredura. Os resultados demonstraram que todas as concentrações do gellan foram capazes de manter a viabilidade das células de L. rhamnosus e L. fermentum em torno de 5 a 7 log, durante 14 semanas, independentemente da temperatura de armazenamento (4°C ou temperatura ambiente). No teste de difusão em ágar, verificou-se que as formulações probióticas levaram à inibição de cepas padrão e clínicas de C. albicans, demonstrando que as cepas de Lactobacillus incorporadas no gellan mantiveram sua atividade antifúngica. As formulações probióticas também conseguiram inibir os biofilmes microcosmos provenientes de pacientes com estomatite protética, reduzindo o número de células viáveis de Candida e desestruturando a arquitetura dos biofilmes. Concluiu-se que o gellan gum mostrou ser um biomaterial promissor como carreador das cepas probióticas de L. rhamnosus 5.2 e L. fermentum 20.4. Além disso, as formulações probióticas desenvolvidas apresentaram ação antifúngica sobre células de C. albicans e biofilmes de estomatite protética, podendo desta forma atuar na prevenção da candidose bucal. (AU)

The use of probiotics has been considered an alternative for the control of oral candidiasis such as denture stomatitis. Recently, our research group isolated oral clinical strains of Lactobacillus rhamnosus (5.2) and Lactobacillus fermentum (20.4) with antifungal activity against Candida albicans. However, it is necessary to develop formulations for clinical use of these probiotic strains in the oral cavity. Thus, the purpose of this project was to develop probiotic formulations in gellan gum hydrogel with antifungal activity that could be used in the control of denture stomatitis. For the preparation of probiotic formulations, the strains L. rhamnosus 5.2 or L. fermentum 20.4 were incorporated into formulations with different concentrations of gellan gum (0.6 to 1%). The viability of Lactobacillus cells in the formulations and the delivery system were tested under different storage conditions, including storage time and temperatures. Next, the effects of the probiotic formulations were evaluated on C. albicans by the agar diffusion method and on microcosm biofilms by viable cell count and scanning electron microscopy analysis. The results showed that all concentrations of gellan were able to maintain the viability of L. rhamnosus and L. fermentum cells around 5 to 7 log for 14 weeks, regardless of storage temperature (4°C or room temperature). In the agar diffusion test, it was found that the probiotic formulations led to the inhibition of standard and clinical strains of C. albicans, demonstrating that the Lactobacillus strains incorporated into gellan maintained their antifungal activity. Probiotic formulations were also able to inhibit microcosm biofilms from patients with denture stomatitis, reducing the number of viable Candida cells and disrupting the architecture of biofilms. As a conclusion, the gellan gum proved to be a promising biomaterial as a carrier of the probiotic strains of L. rhamnosus 5.2 and L. fermentum 20.4. In addition, the probiotic formulations developed showed antifungal action on C. albicans cells and denture stomatitis biofilms, thus being able to act in the prevention of oral candidiasis. (AU)

Espécies de Candida causadoras de vulvovaginites e resistência aos antifúngicos utilizados no tratamento / Candida species cause vulvovaginitis and resistance to antifungals used for treatment

Neste estudo foram identificadas espécies de Candida em isolados de secreção vaginal, avaliados os perfis de suscetibilidade in vitro a antifúngicos e correlacionados com os antifúngicos prescritos para pacientes em um serviço de atenção primária. A identificação das espécies pela Reação em Cadeia da Polimerase mostrou que 36,5% dos isolados foram caracterizados como espécie não-C.albicans. Nos testes de sensibilidade a maioria dos isolados foi suscetível a cetoconazol, fluconazol e itraconazol, contudo cerca de 40% e 50% apresentaram resistência ou sensibilidade dose-dependente a miconazol e nistatina, respectivamente. A análise dos fármacos prescritos para as pacientes revelou que 34,2% dos isolados foram considerados resistentes aos agentes utilizados no tratamento. Diversas espécies de Candida podem causar vulvovaginite com variados perfis de suscetibilidade aos antifúngicos comumente utilizados no tratamento. A identificação das espécies de Candida é relevante para o gerenciamento epidemiológico das infecções, além de ser útil, assim como os testes de suscetibilidade, na escolha do tratamento farmacológico mais eficaz para a paciente.

In this study were identified Candida species from vaginal secretion isolates, evaluated their in vitro antifungal susceptibilities, and correlated these features with antifungal agents prescribed for patients assisted in a primary care service. Species identification by Polymerase Chain Reaction showed that 36.5% of isolates were characterized as non-C. albicans species. In antifungal susceptibility tests most isolates were susceptible to ketoconazole, fluconazole, and itraconazole, although between 40% and 50% of isolates show resistance or dose-dependent susceptibility to miconazole and nystatin, respectively. Analysis of drugs prescribed to patients revealed that 34.2% of the isolates were considered resistant to agents used in treatment. Several Candida species can cause vulvovaginitis and exhibit different susceptibility profiles to antifungal drugs used in treatment. The identification of Candida species is relevant and useful to the epidemiological management of infections. The antifungal susceptibility test may also be useful for choosing most effective drug treatment for each patient.

Atividade antifúngica e potencial antibiofiome do extrato hidroetanólico de Spondias mombin L. e de suas frações frente a leveduras do gênero Candida / Antifungal activity and antibiofiome potential of the hydroethanolic extract of Spondias mombin L. and its fractions against yeasts of the genus Candida

A Candidose é uma patologia que pode ter manifestações locais e também sistêmicas e acontece pela proliferação de fungos do gênero Candida. O tratamento desta patologia é realizado com antifúngicos mas, devido a resistência dos fungos causadores desta enfermidade se faz necessário conhecer outros antifúngicos. A ação antimicrobiana do extrato hidroetanólico de Spondias mombin L. já é conhecida e é fundamental que seja pesquisado a atividade antibiofilme das substâncias, uma vez que estes fungos causam adoecimento quando se acumulam e proliferam. Sabendo disso é que o presente estudo teve por objetivo principal investigar a ação antifúngica e antibiofilme do extrato hidroetanólico (EH) de Spondias mombin L. e das frações de taninos, flavonoides e ácidos fenólicos, frente a fungos do gênero Candida, de importância clínica. Para isto, determinou-se a concentração inibitória mínima por meio do uso de discos e pela técnica da microdiluição em caldo, concentração inibitória mínima de aderência, determinação da curva de morte dos fungos e atividade antibiofilme das frações de ácidos fenólicos, flavonoides e tanino, frente aos fungos Candida albicans, Candida tropicalis, Candida Krusei e Candida Glabrata, utilizando como controle positivo a Nistatina (100.000 UI), em triplicata. Foi visto que, a atividade antifúngica e antibiofilme do EH e de suas frações analisadas existe, porém, quando comparamos as frações com o EH este último apresentou melhor atividade em suas maiores concentrações (500 µg/mL e 250 µg/mL) e quando traçamos o comparativo entre a ação antifúngica e antibiofilme das substâncias testadas e do grupo controle, tivemos melhores resultados do grupo controle frente aos fungos testados. Desta forma foi possível concluir que o extrato hidroetanólico apresentam resultados superiores de atividade antifúngica frente a todos os microrganismos testados, exceto C. krusei e antibiofilme frente a, pelo menos, uma das espécies de Candida e que este extrato teve resultados muito semelhantes e, por vezes, superior ao grupo controle (AU).

Candidosis is a pathology that can have local as well as systemic manifestations and happens due to the proliferation of fungi of the Candida genus. The treatment of this pathology is carried out with antifungal agents, but due to the resistance of the fungi that cause this disease, it is necessary to know other antifungal agents. The antimicrobial action of the hydroethanolic extract of Spondias mombin L. is already known and it is essential that the antibiofilm activity of the substances be researched, since these fungi cause illness when they accumulate and proliferate. Knowing that, this study aimed to investigate the antifungal and antibiofilm action of the hydroethanolic extract (EH) of Spondias mombin L. and its fractions, against fungi of the genus Candida, of clinical importance. For this, the minimum inhibitory concentration was determined through the use of disks and the technique of microdilution in broth, minimum inhibitory concentration of adhesion, determination of the fungal death curve and antibiofilm activity of the fractions of phenolic acids, flavonoids and tannin, against the fungi Candida albicans, Candida tropicalis, Candida Krusei and Candida Glabrata, using nystatin (100,000 IU) as a positive control, in triplicate. It was seen that the antifungal and antibiofilm activity of EH and its analyzed fractions exists, however, when we compare the fractions with EH, the latter showed better activity at its highest concentrations (500 µg/mL e 250 µg/mL) and when we draw the comparison between the antifungal and antibiofilm action of the tested substances and the control group, we had better results than the control group against the tested fungi. Thus, it was possible to conclude that the hydroethanolic extract presented superior results of antifungal activity against all tested microorganisms, except C. krusei and antibiofilm against at least one of the Candida species and that this extract had very similar results and, for times higher than the control group (AU).

Avaliação in vitro da formação de biofilme por cepas de Candida spp. provenientes de indivíduos diabéticos e não diabéticos em ambiente sem e com suplementação de glicose / In vitro evaluation of biofilm formation by Candida spp. strains from diabetic and non-diabetic individuals in environment without and with glucose supplementation

É notório o papel do diabetes mellitus como fator de risco para o desenvolvimento de doenças bucais, como a candidíase bucal, cárie e a periodontite. Assim, este estudo tem como objetivo avaliar a formação de biofilme por cepas de Candida spp. provenientes de diabéticos e não diabéticos em ambiente sem e com suplementação de glicose. Trata-se de um estudo experimental laboratorial in vitro, em três etapas. Etapas um e dois, de obtenção e identificação de 48 cepas de Candida spp., sendo que 32 de C. albicans e 16 de C. glabrata, com auxílio da técnica de PCR. Ainda, a etapa três, de processamento microbiológico, com a avaliação da capacidade de formação de biofilme por três ensaios distintos: I) determinação do número de unidades formadoras de colônia (UFC/mL); II) matéria seca dos biofilmes; III) taxa de crescimento de biofilme em fundo de placa de poliestireno. Inicialmente, objetivando simular as características observadas in vivo, o fundo das placas de cultivo recebeu 400 µL de saliva humana para formação da película adquirida. Decorrida a incubação a 37 °C por 24 h, a saliva foi descartada e cada poço de cultura recebeu suspensão padronizada das leveduras (106 UFC/mL) em Saubouraud Dextrose Broth sem suplementação e com suplementação de glicose a 2 e 10 mg/mL, e as placas foram incubadas a 37 °C por 48 h. Para avaliação do número de UFC/mL, o biofilme aderido foi coletado, diluído seriamente e cultivado em placas de Petri com Sabouraud Dextrose Agar. Após incubação os resultados foram expressos em log UFC/mL. Para a avaliação da matéria seca, a solução remanescente foi liofilizada e mensurada em balança de precisão. A taxa de crescimento de biofilme foi avaliada por microscopia Operetta CLS High Content e o FilmTracer(TM) LIVE/DEAD Biofilm Viability kit, conforme o protocolo do fabricante. Posteriormente, 10 imagens por poço foram obtidas e digitalizadas com ampliação de 40 ×. A área recoberta por biofilme (µm2) das imagens foi avaliada com auxílio do software Harmony High Content Imaging. Os dados apresentaram distribuição não normal, e a comparação entre as cepas de diabéticos e não diabéticos foi realizada pelo teste U Mann-Whitney. O teste de Kruskal-Wallis one way foi utilizado para verificar diferenças entre as condições de suplementação de glicose. O nível de significância estatística adotado foi de α = 5%. Os valores de UFC/mL mostraram um maior crescimento das cepas de C. albicans dos pacientes diabéticos em relação aos não diabéticos nas três suplementações (p < 0,001). Por outro lado, acerca da matéria seca em 10 mg/mL e da taxa de crescimento de biofilme sem suplementação de glicose e a 2 mg/mL, os resultados indicaram uma formação de biofilme maior para cepas de C. albicans dos não diabéticos (p < 0,001). Em conclusão, cepas de C. albicans e C. glabrata provenientes de diabéticos e não diabéticos em ambiente sem e com suplementação de glicose apresentaram resultados distintos quanto à formação de biofilme, por diferentes técnicas

The role of diabetes mellitus is notorious as a risk factor for development of oral diseases, such as oral candidiasis, dental caries, and periodontitis. Thus, this study aimed to evaluate biofilm formation by Candida spp. strains from diabetic and non-diabetic individuals in environment without and with glucose supplementation. This is an in vitro experimental laboratory study, in three stages. Stages one and two of obtainment and identification of 48 Candida spp. strains, with 32 of C. albicans and 16 of C. glabrata, with the help of PCR technique. Also, stage three, of microbiological processing, with evaluation of biofilm formation capacity by three different assays: I) determination of the number of colony forming units (CFU/mL); II) biofilm dry matter; III) biofilm growth rate on the bottom of polystyrene plates. Initially, aiming to simulate the characteristics observed in vivo, the bottom of the cultivation plates received 400 µL of human saliva for formation of acquired pellicle. After the incubation at 37 °C for 24 h, the saliva was discarded and each culture well received standardized suspension of yeast (106 CFU/mL) in Saubouraud Dextrose Broth without supplementation and with glucose supplementation at 2 and 10 mg/mL, and the plates were incubated at 37 °C for 48 h. To assess the number of CFU/mL, the adhered biofilm was collected, seriously diluted, and cultivated in Petri dishes with Sabouraud Dextrose Agar. After the incubation, the results were expressed in log CFU/mL. To assess the dry matter, the remaining solution was lyophilized and measured on a precision scale. The biofilm growth rate was evaluated by Operetta CLS High Content microscopy and FilmTracer(TM) LIVE/DEAD Biofilm Viability kit, according to manufacturer's protocol. Later, 10 images per well were obtained and digitalized with 40 × magnification. The area covered by biofilm (µm2) of the images was assessed with the help of Harmony High Content Imaging software. Data showed non-normal distribution, and the comparison among the diabetic and non-diabetic strains was performed by Mann-Whitney U test. Kruskal-Wallis one-way test was used to verify differences between conditions of glucose supplementation. The level of statistical significance adopted was α = 5%. The values of CFU/mL showed greater growth of the diabetic patient's strains in relation to the non-diabetic ones (p < 0.001). On the other hand, regarding dry matter at 10 mg/mL and the growth rate of biofilm without glucose supplementation and at 2 mg/mL, the results indicated a higher biofilm formation for strains of C. albicans from non-diabetic individuals (p <0.001). In conclusion, C. albicans and C. glabrata strains from diabetic and non-diabetic individuals in environment without and with glucose supplementation showed different results concerning the biofilm formation, using different techniques

Concordance Between Clinical and Laboratory Diagnosis of Abnormal Vaginal Discharge in Chilean Women / Concordância entre o diagnóstico clínico e laboratorial de corrimento vaginal anormal em mulheres chilenas

Abstract Objective To determine the concordance between the clinical diagnosis of women with abnormal vaginal discharge (AVD) and laboratory results using molecular detection and observation of the vaginal microbiota. Methods Cross-sectional study conducted in 2018 in Temuco, Chile. A total of 25 midwives from 12 health centers participated. A total of 125 women>18 years old, volunteers, were recruited. The sample of the posterior vaginal fornix was obtained by speculoscopy. Characteristics of the discharge and of the external and internal genitalia were observed. Gram staining was used to observe vaginal microbiota, blastoconidia and pseudohyphae, and polymerase chain reaction was used for the detection of Trichomonas vaginalis and Candida albicans. The Cohen kappa coefficient was used in the concordance analysis. Results Out of a total of 125 women with AVD, 85.6% consulted spontaneously and 14.4% were diagnosed clinically during a routine check-up. Absolute concordance was significant (p=0.0012), with an agreement of 13.6%. The relative concordance was significant, but fair for bacterial vaginosis (Kappa=0.21; p=0.003) and candidiasis (Kappa=0.22; p=0.001), and slight for trichomoniasis (Kappa=0.14; p=0.009). The percentage of coincidence of the diagnoses (single or mixed) by laboratory and midwives was: bacterial vaginosis 63.2% (12/19), candidiasis 36.5% (27/74), and trichomoniasis 12.5% (4/32). There was 20% coinfection. A total of 36% of the clinical diagnoses of AVD had negative laboratory tests. Conclusion The vulvovaginitis conditions candidiasis and trichomoniasis appear to be overdiagnosed, and bacterial vaginosis appears to be underdiagnosed by the clinical diagnosis when compared with the laboratory diagnosis. The low concordance obtained shows the importance of complementing the clinical diagnosis with a laboratory study of AVD, particularly in women with failed treatments and/or coinfections with unspecific and varying signs and symptoms.

Resumo Objetivo Determinar a concordância entre o diagnóstico clínico de mulheres com corrimento vaginal anormal (AVD) e os resultados laboratoriais por meio da detecção molecular e observação da microbiota vaginal. Métodos Estudo transversal realizado em 2018 em Temuco, Chile. Participaram 25 parteiras de 12 centros de saúde. Um total de 125 mulheres>18 anos, voluntárias, foramrecrutadas. A amostra do fórnice vaginal posterior foi obtida por especuloscopia. Foram observadas características da secreção e da genitália externa e interna. A coloração de Gram foi usada para observar a microbiota vaginal, blastoconídios e pseudo-hifas, e a reação em cadeia da polimerase foi usada para a detecção de Trichomonas vaginalis e Candida albicans. O coeficiente kappa de Cohen foi usado na análise de concordância. Resultados De um total de 125 mulheres com AVD, 85,6% consultaram espontaneamente e 14,4% foram diagnosticados clinicamente durante um check-up de rotina. A concordância absoluta foi significativa (p=0,0012), com concordância de 13,6%. A concordância relativa foi significativa, mas razoável para vaginose bacteriana (Kappa =0,21; p=0,003) e candidíase (Kappa=0,22; p=0,001), e leve para tricomoníase (Kappa=0,14; p=0,009). O percentual de coincidência dos diagnósticos (solteiros ou mistos) por laboratório e parteiras foi: vaginose bacteriana 63,2% (12/19), candidíase 36,5% (27/74) e tricomoníase 12,5% (4/32). Houve 20% de coinfecção. Umtotal de 36% dos diagnósticos clínicos de AVD tiveram exames laboratoriais negativos. Conclusão As condições de vulvovaginite candidíase e tricomoníase parecem ser sobrediagnosticadas, e a vaginose bacteriana parece ser subdiagnosticada pelo diagnóstico clínico quando comparado com o diagnóstico laboratorial. A baixa concordância obtida mostra a importância de complementar o diagnóstico clínico comestudo laboratorial de AVD, principalmente emmulheres com falha de tratamento e / ou coinfecções com sinais e sintomas inespecíficos e variáveis.

Protocolo Brasileiro para Infecções Sexualmente Transmissíveis 2020: infecções que causam corrimento vaginal / Brazilian Protocol for Sexually Transmitted Infections 2020: infections causing vaginal discharge / Protocolo Brasileño para Infecciones de Transmisión Sexual 2020: infecciones que causan flujo vaginal

O tema corrimento vaginal é um dos capítulos que compõem o Protocolo Clínico e Diretrizes Terapêuticas para Atenção Integral às Pessoas com Infecções Sexualmente Transmissíveis, publicado pelo Ministério da Saúde do Brasil em 2020. Tal documento foi elaborado com base em evidências científicas e validado em discussões com especialistas. Neste artigo, são apresentados aspectos epidemiológicos e clínicos relacionados às situações de corrimento vaginal, bem como orientações aos gestores e profissionais de saúde na triagem, diagnóstico e tratamento desses agravos, que constituem uma das principais queixas entre mulheres que procuram serviços de saúde e que podem ser causados por fatores infecciosos ou não infecciosos. Além disso, são apresentadas informações sobre estratégias para as ações de vigilância, prevenção e controle, a fim de promover o conhecimento do problema e a oferta de assistência de qualidade e tratamento efetivo.

The topic of vaginal discharge is one of the chapters of the Clinical Protocol and Therapeutic Guidelines for Comprehensive Care for People with Sexually Transmitted Infections, published by the Brazilian Ministry of Health in 2020. The chapter has been developed based on scientific evidence and validated in discussions with specialists. This article presents epidemiological and clinical aspects related to vaginal discharge conditions, as well as guidelines for health service managers and health professionals about screening, diagnosing and treating these conditions, which are one of the main complaints among women seeking health services, and which may be caused by infectious or non-infectious factors. In addition, information is presented on strategies for surveillance, prevention and control actions, in order to promote knowledge of the problem and provision of quality care and effective treatment.

El tema del flujo vaginal es uno de los capítulos del Protocolo Clínico y Directrices Terapéuticas para la Atención Integral a las Personas con Infecciones de Transmisión Sexual, publicado por el Ministerio de Salud de Brasil en 2020. El documento fue desarrollado en base a evidencia científica y validado en discusiones con especialistas. En este artículo se presentan aspectos epidemiológicos y clínicos relacionados a las situaciones de flujo vaginal, así como pautas para gestores y profesionales de la salud en el cribado, diagnóstico y tratamiento de esas complicaciones, que son una de las principales quejas entre las mujeres que buscan servicios de salud y que pueden ser causadas por factores infecciosos o no infecciosos. Además, se presenta información sobre estrategias para acciones de vigilancia, prevención y control, con el fin de promover la comprensión del problema y la oferta de asistencia de calidad y tratamiento eficaz.

Estudo do potencial antifúngico e do mecanismo de ação do timol contra cepas de Candida parapsilosis resistentes ao fluconazol e a anfotericina B / Study of the antifungal potential and mechanism of action of thymol against strains of Candida parapsilosis resistant to fluconazole and amphotericin B

Objetivo: investigar a suscetibilidade de cepas fúngicas de Candida parapsilosis isoladas de sangue humano frente ao timol, bem como seu mecanismo de ação. Metodologia: foram utilizadas técnicas de microdiluição em placas de 96 poços para determinar a concentração inibitória mínima (CIM) e concentração fungicida mínima (CFM). Além disso, foram realizados testes com o sorbitol e o ergosterol para investigar a ação do timol na parede e na membrana celular fúngica respectivamente. Resultados: nos testes de CIM e CFM, foi observado que as cepas de C. parapsilosis são resistentes ao fluconazol e a anfotericina B, no entanto, o timol desempenhou efeito fungicida com razão CFM/CIM entre 1 e 2. Além disso, a CIM do timol não aumentou quando o sorbitol ou o ergosterol foi adicionado no meio, sugerindo fortemente que este monoterpeno não age na parede celular fúngica ou por ligação ao ergosterol na membrana plasmática. Conclusão: portanto, esses resultados contribuem para a elucidação do mecanismo de ação do timol, sugerindo outros possíveis alvos de interação fármaco-receptor. No entanto, mais investigações de caráter enzimático e molecular em modelos in vitro são necessários para que se possa elucidar completamente o modo de ação desse promissor monoterpeno.

Objective: to investigate the susceptibility of fungal strains of Candida parapsilosis isolated from human blood against thymol, as well as its mechanism of action. Methodology: microdilution techniques were used in 96-well plates to determine minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC). In addition, tests were performed with sorbitol and ergosterol to investigate the action of thymol on the wall and on the fungal cell membrane respectively. Results: in the CIM and CFM tests, it was observed that C. parapsilosis strains are resistant to fluconazole and amphotericin B, however, thymol had a fungicidal effect with MFC/MIC ratio between 1 and 2. In addition, thymol MIC did not increase when sorbitol or ergosterol was added in the medium, strongly suggesting that this monoterpene does not act on the fungal cell wall or by binding to ergosterol on the plasma membrane. Conclusion: therefore, these results contribute to the elucidation of the mechanism of action of thymol, suggesting other possible targets of drug-receptor interaction. However, further investigations of enzymatic and molecular character in in vitro models are necessary to fully elucidate the mode of action of this promising monoterpene.

Avaliação de soluções antifúngicas de guanidina para resina base de dentadura: um estudo in vitro / Evaluation of guanidine antifungal solutions for denture base resin: an in vitro study

Background: The purposes of this study were: (1) to formulate polyhexamethylene guanidine hydrochloride (PHMGH) solutions at different concentrations; (2) to evaluate their antifungal activity against a mature biofilm of Candida albicans on acrylic resins; (3) to evaluate possible effects on acrylic resins flexural strength and surface roughness. Methods: PHMGH solutions were formulated with distilled water and 0.125, 0.250, or 0.5 wt.% of PHMGH. One group without PHMGH was used as control. For antifungal activity analysis, acrylic resin specimens were contaminated with C. albicans. Specimens were immersed in PHMGH solutions or distilled water for 5 or 10 min. Ultimate flexural strength and surface roughness of acrylic resins were evaluated. Results: All PHMGH solutions at 5 or 10 min showed antifungal activity compared to the control group (p<0.05). The group with 0.5 wt.% of PHMGH showed no countable colonies regardless of the time of contact with the acrylic resins. After 10 min, all PHMGH solutions had antifungal effect without differences from 0.125 to 0.5 wt.% of PHMGH. All groups showed high flexural strength after contact with the solutions compatible with ISO 20795-1:2013 recommendation. The values of surface roughness always remained low, from 0.01 to 0.04 µm for all groups. Conclusion: Within the limitations of this study, it was concluded that the use of a solution composed by distilled water and 0.5 wt.% of PHMGH for 5 min was effective as a disinfectant agent against mature biofilm of C. albicans , maintaining acceptable roughness and flexural strength.

Antecedentes: Os objetivos deste estudo foram: (1) formular soluções de cloridrato de polihexametileno guanidina (PHM-GH) em diferentes concentrações; (2) avaliar sua atividade antifúngica contra biofilme maduro de Candida albicans em resinas acrílicas; (3) avaliar efeitos na resistência à flexão e rugosidade da superfície. Métodos: Soluções de PHMGH foram formuladas com água destilada e 0,125, 0,250 ou 0,5% em peso de PHMGH. Um grupo sem PHMGH foi usado como controle. Para análise da atividade antifúngica, amostras de resina acrílica foram contaminadas com C. albicans, e imersas em soluções de PHMGH ou água destilada por 5 ou 10 min. Resistência à flexão final e rugosidade da superfície foram avaliadas. Resultados: Todas as soluções de PHMGH aos 5 ou 10 minutos apresentaram atividade antifúngica em comparação ao grupo controle (p <0,05). O grupo com 0,5% em peso de PHMGH não mostrou colônias contáveis, independentemente do tempo. Após 10 minutos, todas as soluções de PHMGH tiveram efeito antifúngico sem diferenças de 0,125 a 0,5% em peso de PHM-GH. Os grupos apresentaram alta resistência à flexão após o contato com as soluções compatíveis com a recomendação ISO 20795-1: 2013. Os valores de rugosidade da superfície permaneceram baixos, de 0,01 a 0,04 µm para todos os grupos. Conclusão: Dentro das limitações deste estudo, concluiu-se que o uso de uma solução composta por água destilada e 0,5% em massa de PHMGH por 5 min foi eficaz como agente desinfetante contra o biofilme maduro de C. albicans, mantendo rugosidade e resistência à flexão aceitáveis.

Laboratorial aspects of cytolytic vaginosis and vulvovaginal candidiasis as a key for accurate diagnosis: a pilot study / Aspectos laboratoriais da vaginose citolítica e candidíase vulvovaginal como uma chave para o diagnóstico preciso: Um estudo piloto

Abstract Objective To identify clinical, microscopic, and biochemical characteristics that differentiate cytolytic vaginosis (CV) from vulvovaginal candidiasis (VVC). Methods The present cross-sectional study analyzed the vaginal contents of 24 non-pregnant women aged 18 to 42 years who were attended at the Genital Infections Clinic at Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher da Universidade Estadual de Campinas (CAISM-UNICAMP). They were diagnosed either with (CV = 8, VVC = 8) or without vulvovaginitis or vaginal dysbiosis (controls). The socio-demographic, clinical, and gynecological data were obtained from a detailed patient interview. Samples of the vaginal contents were collected for analysis of vaginal pH, gram stain, and specific fungal culture. The Kruskal-Wallis and Fisher exact tests were used to compare the differences between the groups. Odds ratios were used to compare the categorical variables. The significance level was considered at p < 0.05. Results Both women with CV and VVC had a lumpy vaginal discharge (p = 0,002) and vaginal hyperemia (p = 0.001), compared with controls. The inflammatory process was more intense in the VVC group (p = 0.001). In the CV group, there was statistical significance for the lactobacillus amount (p = 0.006), vaginal epithelium lysis (p = 0.001), and vaginal pH (p = 0.0002). Conclusion Cytolytic vaginosis and VVC diagnoses rarely differ on clinical characteristics but have different laboratorial findings. The present study highlights the importance of conducting an accurate investigation through laboratory tests rather than clinical criteria to avoid misdiagnosis.

Resumo Objetivo Identificar características clínicas, microscópicas e bioquímicas que diferenciam a vaginose citolítica (VC) da candidíase vulvovaginal (CVV). Métodos O presente estudo de corte transversal analisou o conteúdo vaginal de 24 mulheres não grávidas, com idades entre 18 e 42 anos, atendidas no ambulatório de Infecções Genitais do Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher da Universidade Estadual de Campinas (CAISM-UNICAMP). Elas foram diagnosticadas com (CV = 8, CVV = 8) ou sem vulvovaginite ou disbiose vaginal (controles = 8). Os dados sociodemográficos, clínicos e ginecológicos foram obtidos em uma entrevista detalhada do paciente. Amostras do conteúdo vaginal foram coletadas para análise do pH vaginal, coloração de Gram e cultura específica de fungos. Os testes exatos de Kruskal-Wallis e Fisher foram utilizados para comparar as diferenças entre os grupos. A razão de chances foi utilizada para comparar as variáveis categóricas. O nível de significância considerado foi de p < 0,05. Resultados As mulheres com VC e CVV apresentaram corrimento vaginal irregular (p = 0,002) e hiperemia vaginal (p = 0,001), em comparação aos controles. O processo inflamatório foi mais intenso no grupo CVV (p = 0,001). No grupo VC, houve significância estatística para a quantidade de lactobacilos (p = 0,006), lise do epitélio vaginal (p = 0,001) e pH vaginal (p = 0,0002). Conclusão Os diagnósticos de VC e CVV raramente diferem nas características clínicas, mas apresentam achados laboratoriais diferentes. O presente estudo destaca a importância de conduzir uma investigação precisa por meio de testes laboratoriais, em vez de critérios apenas clínicos, a fim de evitar erros de diagnóstico.

Nova mutação no gene STAT1 associada com candidíase mucocutânea crônica / New STAT1 gene mutation associated with chronic mucocutaneous candidiasis

Mutações no gene STAT1 (signal transducer and activator of transcription 1) têm sido identificadas como responsáveis pela maioria dos casos sindrômicos da candidíase mucocutânea crônica com herança autossômica dominante (AD). Nesse artigo, descrevemos uma menina de 7 anos que apresentou candidíase da mucosa oral e unhas, além de infecção disseminada da pele e couro cabeludo por Microspora gipseum. Recentemente, a paciente foi diagnosticada e tratada de meningite por Cryptococcus neoformans. Na família não existem outros casos de candidíase. A avaliação imunológica incluiu a detecção de subpopulações de linfócitos (CD3, CD4, CD8, CD20 e células NK), assim como a dosagem de IgG, IgA, IgM e IgE, subclasses de IgG e autoanticorpos. Excluindo-se discreta diminuição de CD3, CD4, CD8, NK e leve aumento de IgG1, os demais exames estiveram dentro da normalidade. O sequenciamento do exoma detectou uma rara mutação em heterozigose no exon 14 do domínio de ligação do DNA (DNA-binding domain) do gene STAT1, ocasionando um provável ganho de função (GOF) responsável pela doença (Gly384Asp). Essa variação foi também identificada pelo sequenciamento de Sanger, não estando reportada nos bancos de dados públicos e apresentando elevado potencial de dano (índice CADD=32). Será interessante contarmos com informações clínicas e estudos com outros pacientes para conhecermos mais essa mutação patológica. Além da apresentação do caso, discutiremos as formas de tratamento existentes.

STAT1 (signal transducer and activator of transcription 1) gene mutations have been identified as responsible for most syndromic cases of chronic mucocutaneous candidiasis with autosomal dominant (AD) inheritance. In this article, we described a 7-year-old girl who presented with candidiasis of the oral mucosa and nails, as well as disseminated infection of the skin and scalp caused by Microsporum gypseum. Recently, the patient was diagnosed and treated for Cryptococcus neoformans meningitis. There are no other cases of candidiasis in the family. The immunological evaluation consisted of detection of subpopulations of lymphocytes (CD3, CD4, CD8, CD20, and NK cells), as well as measurement of IgG, IgA, IgM, and IgE, IgG subclasses, and autoantibodies. Excluding a slight decrease in CD3, CD4, CD8, NK and a minimal increase in IgG1, the others were within normal limits. Exome sequencing detected a rare heterozygous variation in exon 14 of the DNA-binding domain of the STAT1 gene, causing a probable gain of function (GOF) responsible for the disease (Gly384Asp). This variation was also identified by Sanger sequencing, but it was not reported in public databases and had a high potential for damage (Combined Annotation-Dependent Depletion [CADD] score = 32). Having clinical information and conducting studies of other patients will be helpful to learn more about this pathological mutation. In addition to the presentation of the case, we will discuss the existing forms of treatment.

A retrospective study on the oral health of patients in the intesive care unit / Um estudo retrospectivo sobre a condição bucal de pacientes em unidade de terapia intensiva

Introduction: the oral condition of patients in the Intensive Care Unit (ICU) is extremely important for clinical status monitoring, as lesions in the oral mucosa may imply complications and worsening of the health status of these patients. A higher probability of adherence, colonization, and bacterial infection in the oral cavity of patients in the ICU has also been reported. The poor oral hygiene conditions of these patients may be related to the reduction of salivary flow and difficulties in maintaining oral hygiene in a hospital environment, which rarely employs dentists on staff. Objective: to analyze the dental condition of patients admitted to the ICU of Roberto Santos General Hospital, Salvador, Bahia, Brazil. Methodology: a total of 73 patients were evaluated through an oral examination performed with a wooden spatula and sterile gauze under natural light, and data were collected and analyzed. Results: The most commom oral lesions were tongue-coating (41%) and ulcerations in the oral mucosa caused by trauma or dehydration (19.1%). The occurrence of pseudomembranous candidiasis (8.2%), dehydration of the lips and mucosa (26%), and angular cheilitis (9.5%) was additionally recorded. It was observed that 31.5% patients had more than 10 days of hospitalization and of these, 26% presented pseudomembranous candidiasis. This clinical condition was not seen in patients with a shorter hospital stay. Conclusions: this study suggest a possible association between the length of stay of these patients and the clinical conditions presented. Thus, the results of this study may guide preventive and curative measures implemented by dental surgeons who may, in the future, be part of the multidisciplinary team of professionals working in the hospital environment, especially in ICUs.

Introdução: a condição oral de pacientes internados em Unidade de Terapia Intensiva (UTI) é de extrema importância na evolução do quadro clínico desta população, já que lesões na mucosa oral podem implicar em complicações e agravo do estado de saúde destes indivíduos. Tem sido relatado também maior probabilidade de aderência, colonização e infecção bacteriana na cavidade oral de pacientes que se encontram em leitos de UTI. As condições precárias de higiene oral que estes pacientes normalmente apresentam podem estar relacionadas à redução do fluxo salivar e às dificuldades de higienização oral inerentes ao ambiente hospitalar, o qual geralmente não conta com cirurgiões-dentistas integrando a equipe de profissionais da instituição. Objetivo: a presente pesquisa visou analisar a condição odontológica de pacientes internados na Unidade de Terapia Intensiva do Hospital Geral Roberto Santos. Metodologia: setenta e três foram avaliados através de um exame bucal, realizado com espátula de madeira e gaze estéril sob a iluminação de luz natural e seus dados foram coletados e analisados. Resultados: as lesões orais mais comuns foram saburra lingual (41%) e ulcerações na mucosa oral provocadas por trauma ou ressecamento (19,1%). A ocorrência de candidíase pseudomembranosa (8,2%), lábios e mucosas desidratados (26%) e queilite angular foi adicionalmente registrada. Foi observado que dos 31,5% dos pacientes com mais de 10 dias de internação, 26% apresentaram candidíase pseudomembranosa. Essa condição clínica não foi observada em pacientes com menor tempo de internação. Conclusão: o presente estudo sugere uma possível associação entre o tempo de internação destes pacientes e as condições clínicas apresentadas. Desta forma, a descrição dos resultados desta investigação pode contribuir para nortear os cuidados preventivos e curativos a serem adotados por cirurgiões-dentistas que futuramente integrem a equipe multidisciplinar de profissionais que atuam no ambiente hospitalar, em especial, nas unidades de terapia intensiva.

Prevalence, antifungal susceptibility and virulence determinants of oral yeast species isolated from immunodeficient patients in Northeastern Brazil / Prevalência, suscetibilidade a antifúngicos e determinantes de virulência de leveduras orais isoladas de pacientes imunodeficientes do Nordeste do Brasil / Prevalencia, susceptibilidad antifúngica y determinantes de virulencia de levaduras orales aisladas de pacientes inmunodeficientes del Noreste de Brasil

Justificativa e Objetivos: A candidíase oral tem uma ocorrência comum em pacientes imunocomprometidos. No entanto, outras infecções emergentes tornaram-se cada vez mais habituais. O objetivo deste estudo foi investigar a prevalência, os determinantes de virulência e a suscetibilidade a antifúngicos de leveduras que colonizam a mucosa de pacientes imunocomprometidos na região Nordeste do Brasil. Métodos: A amostra foi composta por 60 pacientes HIV positivos atendidos no Serviço de Atendimento Especializado/Hospital Dia do Hospital Universitário Prof. Alberto Antunes, vinculado à Universidade Federal de Alagoas. As amostras foram coletadas em regiões subgengivais e semeadas em CHROMagar para confirmação presuntiva de Candida spp., seguido por PCR e sequenciamento. Além disso, testamos os determinantes de virulência fosfolipase e protease e avaliamos in vitro a concentração inibitória mínima dos antifúngicos anfotericina B e fluconazol. Este projeto foi aprovado pelo Comitê de ética em pesquisa do Centro de Estudos Superiores de Maceió. Resultados: Aproximadamente 63% dos pacientes foram colonizados por leveduras. A espécie C. albicans foi predominante, enquanto as espécies de Candida não-albicans representaram 49% dos isolados, sendo C. dubliniensis e C. parapsilosis as mais comuns. Entretanto, C. intermedia, Bullera penniseticola e Naganishia liquefaciens também foram encontrados. Os determinantes da virulência protease e/ou fosfolipase também foram produzidos por Candida spp. e alguns isolados oportunistas incomuns como Kodamaea ohmeri, N. liquefaciens e Saitozyma podzolica. Além disso, a maioria dos isolados de Candida spp. e algumas espécies oportunistas incomuns apresentaram altos valores de concentração inibitória mínima. Conclusão: Os resultados obtidos indicam que C. albicans continua a ser a espécie predominante na cavidade oral de pacientes imunodeficientes e, juntamente com outras espécies incomuns, pode apresentar alta resistência aos antifúngicos testados.(AU)

Background and Objectives: Oral candidiasis has a common occurrence in immunocompromised patients. However, other emergent infections have become increasingly common. The aim of this study was to investigate the prevalence, virulence determinants and the antifungal susceptibility of yeast colonizing the mucosa of immunocompromised patients in Northeastern Brazil. Methods: Samples from sixty HIV-positive patients seen at the Specialized Service / Hospital Dia - Hospital Universitário Prof. Alberto Antunes from the Federal University of Alagoas were collected from subgingival sites and seeded on CHROMagar for presumptive confirmation of Candida spp. followed by PCR and sequencing. In addition, we tested virulence determinants, phospholipase and protease and evaluated in vitro the Minimum Inhibitory Concentration of antifungals amphotericin B and fluconazole. This project was approved by the Research Ethics Committee of the Center for Higher Studies in Maceió. Results: Approximately 63% of the patients were colonized by yeasts, with C. albicans as the predominant species, while non-Candida albicans species accounted for 49% of the isolates, with C. dubliniensis and C. parapsilosis being the commonest, but C. intermedia, Bullera penniseticola and Naganishia liquefaciens were also found. The virulence determinants protease and/or phospholipase were also produced by Candida spp. and some uncommon opportunistic isolates such as Kodamaea ohmeri, N. liquefaciens and Saitozyma podzolica. Furthermore, most of Candida spp. strains and some uncommon opportunistic species showed high values of minimal inhibitory concentration. Conclusion: Results obtained indicate that C. albicans continues to be the predominant species in oral cavity of immunodeficient patients and along with other unusual species may present high resistance to the antifungals tested.(AU)

Justificación y Objetivos: La candidiasis oral acomete con frecuencia a pacientes inmunocomprometidos. Sin embargo, otras infecciones emergentes se han vuelto cada vez más comunes. El objetivo de este estudio fue investigar la prevalencia, la producción de determinantes de virulencia y la susceptibilidad a antifúngicos de levaduras que colonizan la mucosa de pacientes inmunocomprometidos en la región Nordeste de Brasil. Métodos: Se colectaron muestras de sesenta pacientes VIH positivos atendidos en el Servicio de Atención Especializado/Hospital Día del Hospital Universitario Prof. Alberto Antunes, vinculado a la Universidad Federal de Alagoas. Se colectaron las muestras en las regiones subgingivales y las sembraron en CHROMagar para la presunta confirmación de Candida spp. seguido de PCR y secuenciación. Además, analizamos los determinantes de virulencia fosfolipasa y proteasa y evaluamos in vitro la concentración mínima inhibitoria de los antifúngicos anfotericina B y fluconazol. Este proyecto fue aprobado por el Comité de Ética en Investigación del Centro de Estudios Superiores de Maceió. Resultados: Aproximadamente el 63% de los pacientes fueron colonizados por levaduras, y la C. albicans fue la especie predominante, mientras que las especies de Candida no-albicans representaron el 49% de los aislamientos, de las cuales la C. dubliniensis y la C. parapsilosis fueron las más comunes. Sin embargo, también se encontraron C. intermedia, Bullera penniseticola y Naganishia liquefaciens. Los determinantes de virulencia de proteasa y/o fosfolipasa también fueron producidos por Candida spp. y algunos aislados oportunistas inusuales como Kodamaea ohmeri, N. liquefaciens y Saitozyma podzolica. Además, la mayoría de los asilados de Candida spp. y algunas especies oportunistas inusuales mostraron valores altos de concentración mínima inhibitoria. Conclusión: Los resultados obtenidos indican que C. albicans continúa siendo la especie predominante en la cavidad oral de pacientes inmunodeprimidos y, junto con otras especies poco comunes, puede presentar una alta resistencia a los antifúngicos evaluados.(AU)

Fatores associados à presença de Candida spp. em amostras de fluido vaginal de mulheres residentes em comunidades quilombolas / Factors associated with the presence of Candida spp. in vaginal fluid samples from women living in quilombola settlements

RESUMO: Objetivo: Investigar a frequência e fatores associados à detecção de Candida spp. em fluido vaginal de mulheres residentes em uma comunidade quilombola. Materiais e Método: Um estudo transversal foi conduzido com 177 mulheres residentes em uma comunidade quilombola no Nordeste do Brasil. Foram coletados dados sociodemográficos, hábitos de vida, saúde geral e saúde reprodutiva. O material coletado na região do colo do útero foi submetido a exame citopatológico. Amostras de fluido vaginal foram coletadas para a análise microbiológica. Os testes Qui-quadrado, exato de Fisher e modelos de Re-gressão Logística foram utilizados na análise estatística. Resultados: Foi detectado Candida spp. em 28,9% das amostras. A espécie mais frequente nos casos positivos foi a Candida albicans (49%), seguida da Candida krusei (39,2%). Após o ajustamento, observou-se que mulheres com idade igual ou maior que 50 anos apresentaram maior chance da detecção de Candida spp. no fluido vaginal (OR ajustada = 3,46; IC95% = 1,68-7,12), enquanto as mulheres com queixa de corrimento vaginal apresentaram uma chance menor de detecção de Candida spp. (OR ajustada = 0,29; IC95% = 0,11-0,78). Conclusão: Os achados sugerem uma elevada detecção de Candida spp. no fluido vaginal entre mulheres residentes em comunidades quilombolas, o que sinaliza a necessidade do planejamento de medidas para prevenção e rastreamento de caso de candidíase vulvovaginal neste grupo populacional. Além disso, a presença de Candida spp. foi mais elevada em mulheres a partir da quinta década de vida, menor nas mulheres com queixas de corrimento vaginal. (AU)

ABSTRACT: Objective: Investigate the frequency and factors associated with the detection of Candida spp. in vaginal fluid from women living in a quilombola settlement. Materials and Method: A cross-sectional study was conducted with 177 women living in a quilombola settlement in Northeast, Brazil. Socio-demographic data, living habits, general health, and reproductive health were collected. The material collected in the region of the cervix was submitted to cytopathological examination. Vaginal fluid samples were collected for microbiological analysis. Chi-square test, exact Fisher's test, and logistic regression models were used for the statistical analysis. Results: Candida spp. was detected in 28.9% of the samples. The most frequent species in positive cases were Candida albicans (49%), followed by Candida krusei (39.2%). After adjustment, it was observed that women aged over 50 years had a higher chance of detecting Candida spp. in vaginal fluid (OR adjusted = 3.46; 95% CI = 1.68-7.12), while women complaining of vaginal discharge had a lower chance of detecting Candida spp. (OR adjust-ed = 0.29; 95% 95% CI= 0.11-0.78). Conclusion: The findings suggest a high detection of Candida spp. in vaginal fluid among women living in quilombola settlements, which indicates the need for planning measures for prevention and track the cases of vulvovaginal candidiasis in this population group. Besides, the presence of Candida spp. was higher in women from the fifth decade of life, lower in women with complaints of vaginal discharge. (AU)